标记抗体或抗原：
将放射性同位素（如[^125^I]碘）标记到抗体或抗原上，形成放射性示踪剂。标记物的选择取决于待测物的性质和检测需求。
免疫反应：
将标记的抗体或抗原与样本中的待测物混合，发生特异性结合反应。由于标记物和待测物竞争性结合有限的抗体或抗原位点，因此放射性信号的强度与样本中待测物的浓度成反比。
分离结合物和未结合物：
通过物理或化学方法（如离心、过滤、沉淀等）分离结合物（标记物与待测物结合的部分）和未结合物（游离的标记物）。
放射性测量：
使用放射性探测器（如闪烁计数器或γ计数器）测量分离后的结合物或未结合物的放射性强度。放射性信号的强弱反映了样本中待测物的浓度。
数据分析：
根据标准曲线（通过已知浓度的标准品建立）计算样本中待测物的浓度。